| 公開(公告)號(hào) | CN1157481C |
| 公開(公告)日 | 2004.07.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN01104435.7 |
| 申請(qǐng)日期 | 2001.02.27 |
| 專利名稱 | 一種不需要反轉(zhuǎn)錄步驟的RNA分子PCR擴(kuò)增法 |
| 主分類號(hào) | C12P19/34 |
| 分類號(hào) | C12P19/34 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 黃道培 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 黃道培;范辛浩 |
| 地址 | 201206 上海市浦東新金橋路1998號(hào) |
| 頒證日 | 2004.07.14 |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京萬科園知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 |
| 代理人 | 張亞軍;曹詩健 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種RNA分子的PCR擴(kuò)增法，該方法不需要反轉(zhuǎn)錄步驟，它包括下列步驟：1)核酸雜交：將待測(cè)樣品中加入裂解雜交液，混勻后再加入PS-DNA，65℃保溫過夜，再加入異丙醇沉淀離心后，棄上清液； |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種不需要反轉(zhuǎn)錄的PCR RNA分子擴(kuò)增法，可用于分子生物學(xué)對(duì)疾病的診斷。對(duì)病原體，尤其是RNA病毒的確診可廣泛用于用血安全等領(lǐng)域，本方法包括產(chǎn)生一種與RNA分子互補(bǔ)的單鍵DNA保護(hù)分子(PS-DNA)，這種約300個(gè)鹼基對(duì)的單鍵DNA片斷，可以和RNA(病毒)分子形成DNA：RNA雜交鍵。又使用了一種抗體和一種酶將由雜交形成的DNA：RNA雜交鏈通過特異性抗體結(jié)合而分離出來，再把未形成DNA：RNA雜交鏈的殘留PS-DNA降解，然后就可以用常規(guī)PCR放大，進(jìn)行產(chǎn)物檢測(cè)了。該法與RT-PCR法相比較具有雜交效率高于逆轉(zhuǎn)錄效率，特異性強(qiáng)，靈敏度高，成本低，操作方便等特點(diǎn)。將適用于多種臨床用核酸檢測(cè)試劑的配制和生產(chǎn)。 |
| 國(guó)際公布 |
