| 公開(公告)號 | CN1511587A |
| 公開(公告)日 | 2004.07.14 |
| 申請(專利)號 | CN02160005 |
| 申請日期 | 2002.12.27 |
| 專利名稱 | Vero細胞流行性感冒純化疫苗的制備方法及其應用 |
| 主分類號 | A61K39/145 |
| 分類號 | A61K39/145;C12N7/01;A61P31/16 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 遼寧衛(wèi)星生物制品研究所(有限公司);李忠義;劉江秋 |
| 發(fā)明(設計)人 | 李忠義;劉江秋 |
| 地址 | 110044遼寧省沈陽市大東區(qū)東站街51甲-3號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權項 | Vero細胞流行性感冒純化疫苗其特征在于：(1)制備該疫苗的先進的Vero細胞培養(yǎng)技術以及用此細胞培養(yǎng)技術將用于制備疫苗的甲1(A/New Caledonia/20/99(H1N1)、甲3(A/莫斯科/10/99(H3N2)和乙型(B/香港/330/2001)流感病毒株在傳代的Vero細胞上增殖，獲得了高滴度病毒；其病毒效價均達到1∶160以上，具有較好的免疫原性及抗原性。(2)本生產工藝建立了Vero細胞規(guī)�；囵B(yǎng)技術，比較了各種轉瓶培養(yǎng)的最佳條件，選擇了簡便經(jīng)濟質量易于控制的3L轉瓶培養(yǎng)技術用于本疫苗生產。(3)甲1、甲3和乙型流感毒種分別在加入促病毒繁殖因子的Vero細胞上(細胞由美國ATCC引進，中國藥品生物制品檢定所提供，生產疫苗時所用細胞代數(shù)不超過140代)增殖，凍融后收獲，合并即為原液，原液經(jīng)切向流濾過(0.45μm膜板)，Pellicon 100KD超濾濃縮，Sepharose 4FF(BPG柱)純化，β-丙內酯滅活，再經(jīng)稀釋、除菌，三價配伍，加保護劑、防腐劑為半成品，檢定合格后，分裝安瓶并進行成品檢定，合格后包裝成純化疫苗。半成品檢定：a.無菌試驗：陰性，合格；b.血凝素含量測定：≥12μg/株/0.5mlc.總蛋白量測定：≤300μg/0.5mld.硫柳汞含量測定：≤0.10mg/ml成品檢定：a.鑒別試驗：與相應的免疫血清進行單擴試驗，各型的血凝素抗原應為陽性；b.無菌試驗：陰性(無細菌生長)，合格；c.異常毒性測定：無異常毒性，合格；d.過敏原測定：陰性，合格；e.血凝素含量測定每型均符合標準，均應≥12μg/株/0.5ml；f.殘余牛血清含量測定：≤25ng/0.5mlg.細胞DNA含量≤10Pg/0.5mlh.內毒素測定：≤100EU/0.5ml；i.pH值：6.8-7.8；j.裝量：0.50ml/支；k.外觀：輕微乳白色液體，無異物(4)建立了本疫苗的質量控制標準：特別是抗原量(血凝素)的檢定，用單向輻射免疫擴散法檢測，各型均不低于12μg/0.5ml。(5)用甲1、甲3和乙型毒株生產和檢定已經(jīng)形成系統(tǒng)化，生產工藝和質量控制穩(wěn)定而且合理，能確保疫苗產品的質量。(6)使用本生產技術生產的Vero細胞流感純化疫苗避免了疫苗生產、純化形成制品時來自人或者動物附加的蛋白質、原材料的污染。比目前我國已上市使用的流感雞胚疫苗具有更好的免疫效果和安全性，其中包括大大減輕的變態(tài)反應等。因而具有良好的社會效益和較大的經(jīng)濟效益。(7)Vero細胞流行性感冒純化疫苗在預防流感中予以應用，其特征是全程免疫只需一針0.5ml，皮下接種，能產生良好的免疫力。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬于預防用新生物制品新型疫苗領域，涉及一種人用Vero細胞流行性感冒純化疫苗的制備方法及其制品在預防流感中的應用內容。本發(fā)明中制備Vero細胞流感純化疫苗的方法：在來源于非洲綠猴腎傳代的Vero細胞上加入促病毒增殖因子后，分別感染流感甲1、甲3和乙型流感病毒，72小時后收集三型病毒，經(jīng)凍融、切向流過濾去除細胞碎片澄清，超濾濃縮、β-丙內酯滅活、Sepharose4FF柱層析純化，稀釋三型病毒原液，再合并三型病毒液，加保護劑、防腐劑成半成品流感純化疫苗，然后分裝為成品以及對疫苗原液、半成品及成品的檢測。本發(fā)明的Vero細胞流感純化疫苗解決了以往生產疫苗采用雞胚繁殖的生產方法，具有安全有效、抗原含量高、副反應小，質量易于控制、成本低的特點，全程免疫只需接種一次。 |
| 國際公布 |
