| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1127575C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2003.11.12 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN99112336.0 |
| 申請(qǐng)日期 | 1999.07.22 |
| 專利名稱 | 均相熒光探針PCR結(jié)核桿菌檢測(cè)方法 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/04 |
| 分類號(hào) | C12Q1/04;C12Q1/25;G01N33/50 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 廈門泰倫生物工程有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李慶閣;梁基選;欒國(guó)彥 |
| 地址 | 361006福建省廈門市湖里區(qū)華昌路龍州大廈五樓 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廈門市首創(chuàng)君合專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 張松亭 |
| 國(guó)省代碼 | 福建;35 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種均相熒光探針PCR結(jié)核桿菌檢測(cè)方法，采用PCR方法擴(kuò)增結(jié)核桿菌(TB)基因序列，利用分子信標(biāo)與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交，并且測(cè)量反應(yīng)液的熒光強(qiáng)度，進(jìn)行結(jié)果測(cè)定，其特征在于選擇的TB引物為結(jié)核桿菌插入序列IS986的一對(duì)引物：ISN-1：5’-CGT GAG GGC ATC GAG GTG GC-3’ISN-2：5’-GCG TAG GCG TCG GTG ACA AA-3’TB探針為：在兩引物擴(kuò)增片段內(nèi)設(shè)計(jì)靶序列互補(bǔ)的寡核苷酸探針，5’端用FAM修飾，3’端用氨基修飾，并標(biāo)記DABCYL，其序列為：FAM-5’-GCG AGG AAC GGC TGA TGA CCA AAC TCT CGC-3’-DABCYL樣品熒光強(qiáng)度/陰性對(duì)照熒光強(qiáng)＞2.0為陽(yáng)性樣品熒光強(qiáng)度/陰性對(duì)照熒光強(qiáng)度＜2.0為陰性。 |
| 摘要 | 本發(fā)明根據(jù)結(jié)核桿菌(TB)基因序列，采用TB染色體插入序列IS986設(shè)計(jì)合成引物，用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)對(duì)TB特異性片段進(jìn)行擴(kuò)增，使用分子信標(biāo)探針與擴(kuò)增產(chǎn)物雜交，作為結(jié)果測(cè)定的方法，通過(guò)熒光計(jì)直接測(cè)量反應(yīng)管的熒光強(qiáng)度，檢測(cè)標(biāo)本是否存在結(jié)核桿菌。 |
| 國(guó)際公布 |
