| 公開(公告)號 | CN1453355A |
| 公開(公告)日 | 2003.11.05 |
| 申請(專利)號 | CN02109527.2 |
| 申請日期 | 2002.04.23 |
| 專利名稱 | 從地龍體內提取超氧化物歧化酶的方法 |
| 主分類號 | C12N9/08 |
| 分類號 | C12N9/08;C07K1/14 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 劉玉才 |
| 發(fā)明(設計)人 | 劉玉才;劉晟至 |
| 地址 | 110014遼寧省沈陽市沈河區(qū)沈洲路28-4-E座432號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 沈陽智龍專利事務所 |
| 代理人 | 宋鐵軍 |
| 國省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權項 | 一種從地龍體內提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于：該方法的制備步驟如下：a、將活蚯蚓洗凈，置于新鮮水中或含不超過0.3％(以重量計)的有機酸鈉鹽中清洗，直至其消化道內的污物被徹底清除，然后在除去其表面軀體上的所有污物；b、將活蚯蚓濕磨，得到的蚓汁在-60℃～-10℃的溫度下冷凍后儲存；c、新鮮的蚓汁或其冷凍物在PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液中勻漿2L/kg，攪拌1～2小時，15000r/min離心30分鐘，棄沉淀物得清夜；d、上述清夜于65℃加熱10～20分鐘，冷卻至4℃，過濾后濾液中加入1.25倍體積的丙酮，收集沉淀，沉淀物用少量的PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；e、上清液在攪拌下加入內含10molmg、10molCu、10molZn，飽和度達45％，繼續(xù)攪拌15分鐘，然后在2000r/min離心30分鐘，棄去沉淀，向上清液中繼續(xù)加入硫酸銨溶液，使其飽和度達65％，離心收集沉淀；f、將上述沉淀溶解在PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液中，接著透析至無SO2-4透析液最后上DEAE-Sephadex A-50層析柱(柱床體積為2.5×50cm)，收集洗脫液，濃縮、冷卻、干燥，即得藍綠色的Cu、ZnSOD。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種從生物體內提取超氧化物歧化酶的工藝制備方法。該方法的制備步驟為：將活蚯蚓洗凈，濕磨，得到的蚓汁經過冷凍、在緩沖液中勻漿、攪拌，離心，棄沉淀物得清液；上述清液進行加熱，冷卻，過濾后濾液中加入丙酮，沉淀物用緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；上清液在攪拌下加入mg、Cu、Zn，然后離心，棄去沉淀，向上清液中加入硫酸銨溶液，離心收集沉淀；將上述沉淀溶解在緩沖液中，接著透析至無SO2-4，透析液最后上層析柱收集洗脫液，濃縮、冷卻、干燥，即得藍綠色的Cu、ZnSOD。本發(fā)明的目的是提供一種從地龍的體內提取超氧化物歧化酶的方法，以解決消耗資源大、提取SOD成分低等方面存在的問題。 |
| 國際公布 |
