方法名稱: |
云南紅豆杉枝葉—10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的測(cè)定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
用于云南紅豆杉枝葉中102去乙酰巴卡亭Ⅲ含量的測(cè)定 |
方法原理: |
本品細(xì)粉用95%乙醇-乙酸乙酯( 90 ∶10)超聲提取,經(jīng)液相色譜儀分離,在227nm測(cè)定,外標(biāo)法計(jì)算10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器設(shè)備 HP1100高效液相色譜儀(二極管陣列檢測(cè)器、蒸發(fā)光檢測(cè)器) 色譜條件 色譜柱:C18色譜柱( 250mm×4.6 mm,5μm);流動(dòng)相:甲醇2乙腈2水(5∶35∶6);檢測(cè)波長(zhǎng):227 nm;流速:0.8 ml/min;柱溫:30℃;進(jìn)樣量:10μl。 |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液制備 精密稱取10-去乙酰巴卡亭Ⅲ對(duì)照品12.42mg于50 ml量瓶中,以甲醇溶解并定容,即得對(duì)照品儲(chǔ)備液(0.2435 mg/mL),精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液1ml,定溶于10ml的量瓶中,作為對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 取干燥、粉碎、過(guò)60目篩后的云南紅豆杉藥材枝葉10g,用95%乙醇∶乙酸乙酯( 90∶10) 150ml超聲提取30min,抽濾,提取三次,合并濾液,50℃減壓回收溶劑至濃膏,加入水∶石油醚( 1:1) 40ml萃取,去石油醚層,再加20ml石油醚萃取水層,多次萃取,直到萃取至石油醚無(wú)色,加入二氯甲烷10ml萃取水層,萃取多次,合并下層二氯甲烷萃取液,減壓蒸干,用少量甲醇溶解,拌少量的硅膠揮干后過(guò)硅膠柱,硅膠柱用氯仿濕法裝柱,分別用氯仿、氯仿∶甲醇( 97∶3) 、氯仿∶甲醇(90∶10) 進(jìn)行梯度洗脫。收集氯仿∶甲醇(97∶3) 的洗脫液,揮干,用少量甲醇溶解,定容到1 ml,微孔濾膜(0.45μm) 濾過(guò),作為供試樣品。 |
操作步驟: |
精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液1Oμl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算102去乙酰巴卡亭Ⅲ含量 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
安春志,羅佳波,劉莉等. 高效液相色譜法測(cè)定云南紅豆杉枝葉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量. 廣州醫(yī)藥.2006,37(5):47~49 |