| 公開(公告)號 | CN1738914A |
| 公開(公告)日 | 2006.02.22 |
| 申請(專利)號 | CN200380108984.5 |
| 申請日期 | 2003.11.21 |
| 專利名稱 | 使用編碼雙鏈啟動子一條鏈的引物的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12P19/34(2006.01)I;C07H21/04(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 2002.11.21 US 60/428,013 |
| 申請(專利權(quán))人 | 震源技術(shù)公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | G·A·達(dá)爾;J·J·詹得里薩克 |
| 地址 | 美國威斯康星 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 2003-11-21 PCT/US2003/037454 |
| 進(jìn)入國家日期 | 2005.07.19 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 羅菊華 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項(xiàng) | 用于制備對應(yīng)于靶核酸中的靶序列的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的方法，該方法包括：(a)獲得靶核酸；(b)獲得有義啟動子引物，該有義啟動子引物包括含有有義轉(zhuǎn)錄啟動子的5′-端部分以及互補(bǔ)于靶的3′-端部分；(c)使有義啟動子引物與靶核酸退火，以形成靶核酸-有義啟動子引物復(fù)合體；(d)使靶核酸-有義啟動子引物復(fù)合體與DNA聚合酶在聚合反應(yīng)條件下接觸，以獲得互補(bǔ)于靶序列的第一鏈cDNA；(e)獲得第一鏈cDNA；(f)在連接條件下連接第一鏈cDNA，以獲得含有義啟動子的環(huán)形第一鏈cDNA；(g)獲得反義啟動子寡核苷酸；(h)使反義啟動子寡核苷酸與含有義啟動子的環(huán)形第一鏈cDNA退火，以獲得環(huán)形轉(zhuǎn)錄底物；(i)獲得環(huán)形轉(zhuǎn)錄底物；和(j)使環(huán)形轉(zhuǎn)錄底物與RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄條件下接觸，其中獲得轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了通過使用編碼雙鏈啟動子一條鏈的啟動子引物獲得環(huán)形單鏈DNA轉(zhuǎn)錄底物而由RNA聚合酶來制備對應(yīng)于靶序列的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的方法、組合物和試劑盒。本發(fā)明對于研究、診斷和治療應(yīng)用例如制備對應(yīng)于mRNA的cDNA、制備有義或反義探針、檢測基因或生物體特異性序列或制備RNAi等具有廣闊的適用性。 |
| 國際公布 | 2004-06-10 WO2004/048596 英 |
